Dois métodos para a remoção de peptídeos de resinas de fase sólida

Após a síntese química de peptídeos por FMOC em fase sólida, existem muitos métodos de clivagem e agora são introduzidos dois tipos básicos que geralmente usamos.

1. Método de ácido forte (TFA)

A resina seca foi colocada em um frasco de agitação e foi adicionada uma quantidade apropriada de catadores contendo. (Casqueiros) Reagente de corte de ácido trifluoroacético (TFA), resina 10-25ml/g, tapada e abalada intermitentemente à temperatura ambiente com rotação. A resina foi drenada, lavada 2-3 vezes com o novo TFA, o filtrado foi combinado e 8-10 vezes o volume de éter de dietílico de gelo foi descartado. Às vezes, algum TFA pode ser cozido no vapor para obter precipitados de peptídeo bruto. O éter pode ser usado para aumentar a eficiência da precipitação pelo resfriamento assistido por gelo. Finalmente, o produto peptídico bruto precipitado foi coletado.

Resina adequada: resina Wang ou Rink Amide Resina

2, método de ácido fraco (TFA ou diluição do ácido acético) 1% TFA:

1g de resina contendo peptídeos foi adicionado a um balão de galo de vidro de solução de diclorometano contendo 1%de TFA, selado e abalado por 2 min. O filtrado foi pressionado com nitrogênio em outro novo balão de metanol contendo 10% de piridina e o procedimento foi repetido 10 vezes. Os peptídeos protetores restantes na resina foram lavados três vezes usando 30 ml de DCM e 30 ml de MeOH. Os resíduos foram verificados e limpos por TLC ou HPLC. Todos os filtrados foram combinados e 5% do solvente foi cozido sob pressão reduzida. Quarenta ml de água foram adicionados e a precipitação ajudou na mistura de resfriamento. Após a filtração, o produto foi lavado três vezes com água limpa, colocada em um forno de secagem a vácuo e seca com KOH ou P2O5.

Ácido acético diluído:

Os peptídeos pendurados na resina foram tratados com solução de corte por 2 h usando ACOH // TFE/DCM (2: 2: 6), a resina foi filtrada e a resina foi lavada três vezes com solução de corte. O excesso de ácido acético foi removido adicionando 15 vezes n-hexano ao filtrado misto e rabos rotativos.

Resina de aplicação: resina 2-CTC