Algumas perguntas e respostas sobre a solubilidade de peptídeos modificados

1. Que impurezas existem nos não-HPLC purificados?

R: Peptídeo modificado e impurezas peptídicas não modificadas em peptídeo modificado de petróleo e dessalinizado: como peptídeo modificado sem comprimento de comprimento cheio e algumas matérias-primas como DTT, TFA, etc.

2. Que impurezas são purificadas pelo HPLC?

R: O peptídeo modificado purificado por HPLC ainda terá muitas impurezas, e as impurezas geralmente são peptídeos curtos e um pouco de TFA.

3. Quanto tempo é adequado?

R: A síntese do peptídeo modificado deve considerar o comprimento do peptídeo modificado, carga, hidrofilicidade e hidrofobicidade e outros fatores. Quanto maior o comprimento total, menor a pureza e o rendimento do produto bruto e maior a dificuldade de purificação e a probabilidade de dificuldade na síntese. No entanto, não há como alterar a sequência do domínio funcional do peptídeo modificado, mas para concluir a síntese do peptídeo modificado, às vezes apenas alguns aminoácidos auxiliares podem ser adicionados no upstream e a jusante do domínio funcional para melhorar a solubilidade e a hidrofobicidade do peptídeo modificado. Se o peptídeo modificado for muito curto, pode haver problemas na síntese. O primeiro problema é que o peptídeo modificado sintetizado tem certas dificuldades no processo de pós-processamento. O peptídeo modificado dentro de 5 peptídeos geralmente possui aminoácidos hidrofóbicos, caso contrário, o pós-processamento é difícil. Peptídeos modificados abaixo de 15 resíduos de aminoácidos geralmente podem ser obtidos com rendimento e rendimento satisfatórios.

Algumas perguntas e respostas sobre a solubilidade de peptídeos modificados

4. Como julgar a solubilidade do peptídeo modificado da sequência?

(1) O peptídeo modificado contendo uma alta proporção de aminoácidos hidrofóbicos como Leu, Val, Iie, Met, Phe e TRP não é facilmente solúvel em solução aquosa ou quase insolúvel. Este aminoácido pode ser problemático em purificação ou síntese.

(2) the proportion of hydrophobic amino acids under normal conditions < The proportion of charged amino acids can reach up to 20%. If the N or C of the modified peptide is short, the increase of polar amino acids can also improve the solubility.

5. Por que é difícil sintetizar Cys, Met ou TRP?

R: Peptídeos modificados contendo Cys, MET ou TRP não podem ser sintetizados e os produtos de alta pureza são difíceis de obter. Isso se deve principalmente ao fato de que esses grupos são menos estáveis ​​e propensos à oxidação. O uso e o armazenamento desses peptídeos modificados requerem cuidados especiais para evitar a abertura repetida da tampa.

6, por que algum rendimento ou pureza sintética será muito baixa?

R: Há uma diferença considerável entre a síntese de peptídeos modificados e a síntese de iniciadores. Existem muito poucos iniciadores que não podem ser sintetizados, mas muitas vezes existem peptídeos modificados que não podem ser sintetizados. Como Val, Ile, Tyr e TRP, Leu, Phe, Gln e THR aminoácidos próximos ou de alça, os peptídeos modificados não podem se unir dissolvidos no processo de síntese, a eficiência sintética é menor. A eficiência da síntese e a pureza do produto são muito baixas nos seguintes casos, como: repetir pro, serer, repetir asp, quatro gly consecutivos, etc.

7. Como é purificado?

R: Os peptídeos modificados são geralmente purificados por coluna de fase reversa (como C8, C18, etc.) a 214nm. O sistema buffer é geralmente uma solução contendo TFA, Ph2.0. Buffera continha 0,1%de Tfainddh2O e Bufferb continham 1%de TFA/ACN/PH2.0. Foi dissolvido em buffera antes da purificação; Se a solução não for satisfatória, dissolva -se com bufferb e dilua com buffera; Para peptídeos modificados altamente hidrofóbicos, às vezes é adicionado um pouco de ácido fórmico ou acético.