Visão geral da expressão de proteínas

A expressão proteina refere-se à tecnologia de reproduzir o gene alvo em um vetor artificial e depois introduzir-o no sistema de célula ou livre de células destinatário para expressar a proteína no sistema heterólogo.

A expressão de proteínas pode resolver o problema que as proteínas nativas são difíceis de obter. Desde o primeiro estabelecimento da expressão heteróloga de proteínas na década de 1970, milhares de proteínas recombinantes foram expressas com sucesso, o que promove efetivamente o desenvolvimento contínuo de biotecnologia e pesquisa e indústria biomédica.

Objetivo:

Através da expressão de proteínas, é primeiro possível obter proteínas difíceis de obter de fontes naturais.

Em segundo lugar, o grande lote e a alta pureza dos produtos de expressão de proteínas não apenas facilitam a análise da proteína alvo, mas também reduzem bastante o custo.

Mais importante, as proteínas recombinantes são geralmente selecionadas para indicar uma alta biossegurança da célula hospedeira, evitando assim alguns riscos potenciais de biossegurança do hospedeiro patogênico.

Método:

Inclui principalmente os processos de replicação de fragmentos de genes, introdução no sistema de expressão, expressão induzida, purificação e análise do produto.

Visão geral da expressão de proteínas

Classificação:

Os sistemas de expressão de proteínas geralmente podem ser divididos em:

1. Sistema de expressão nuclear: Escherichia coli é o sistema de expressão de proteínas mais comum, que tem as vantagens de fundo genético claro, reprodução conveniente, baixo custo e alta expressão. No entanto, não possui mecanismo de modificação de tradução e não é adequado para glicosilação ou clivagem de ponto de seleção especial para modificar a expressão de proteínas. Bacillus subtilis também pode ser usado para expressão de proteínas, e suas vantagens são uma forte capacidade de expressão metabólica e baixa atividade de protease, que gradualmente atraíram a atenção.

2. Está incluído principalmente. System Sistema de expressão de leveduras (levedura vermelha comum, fermento de fermentação, etc.), o fermento pode ser suave de alta densidade, pode ser modificado após a tradução, tem as vantagens das células hospedeiras procarióticas e eucarióticas e também é um bom sistema de expressão de proteínas. System Sistema de expressão de células de insetos: os genes exógenos são transfectados para células de insetos por vetor de baculovírus para expressão. É um sistema de expressão alto para proteínas eucarióticas, adequadas para proteínas da membrana, proteínas macromoleculares, proteínas quinases e outras proteínas difíceis de expressar no sistema procariótico. System Sistema de expressão celular de mamíferos: a eficiência de tradução e decoração das células de mamíferos é muito maior que a dos sistemas de células de levedura e insetos. A estrutura e a função das células de mamíferos estão mais próximas das proteínas eucarióticas nativas, mas o nível de expressão é baixo e o custo é alto.

3. Sistema de expressão sem células: As proteínas alvo podem ser expressas diretamente a partir de partículas e produtos de PCR, e o sistema de expressão são extratos sem células de Escherichia coli, embriões de trigo, reticulócitos de coelho, etc. As vantagens da expressão de proteínas sem células são a capacidade de expressar produtos que são difíceis de expressar em outros sistemas, alta taxa de impulso e automação, e automatização, mas a expressão de baixo e a mais.