A modificação da fosforilação desempenha um papel crucial na vida das células e afeta vários aspectos. A fosforilação das proteínas está intimamente relacionada a vários processos biológicos, como reparo de danos ao DNA, regulação da transcrição, transdução de sinal e regulação da apoptose celular. O estudo de proteínas e peptídeos fosforilados ajuda a revelar os mecanismos desses processos e aprofundar nossa compreensão da essência das atividades da vida. A biotecnologia do peptídeo de Hong possui tecnologia de marcação de peptídeos de fosforilação madura. Aproveitando suas próprias vantagens tecnológicas e de matéria-prima, podemos sintetizar peptídeos contendo serina fosforilada (PSER), treonina fosforilada (PTHR) e tirosina fosforilada (PTYR) e fornece peptídeos de alta qualidade com um a cinco locais de fosforlação.
Visão geral da tecnologia de marcação de fosforilação:
Os peptídeos fosforilados se referem principalmente aos grupos hidroxila da cadeia lateral de resíduos serina (Ser), tirosina (Tyr) e treonina (THR) na cadeia peptídica sendo modificados em ésteres de fosfato ácido. Os peptídeos fosforilados desempenham um papel crucial no estudo da fosforilação de proteínas. Portanto, é particularmente importante explorar profundamente as reações de fosforilação de proteínas e peptídeos e encontrar métodos sintéticos maduros e simples.
Atualmente, os métodos de modificação de fosforilação de peptídeos se enquadram principalmente em duas categorias:
(1) Incorpore diretamente os aminoácidos fosforilados adequadamente protegidos na sequência peptídica:
Primeiro, os aminoácidos que precisam ser fosforilados (como THR, Ser ou Tyr) são submetidos a tratamento de fosforilação e protegidos adequadamente. Em seguida, após o processo convencional de síntese de peptídeos em fase sólida (SPPS), os monômeros fosforilados estão ligados aos locais específicos do polipeptídeo. Este método é simples de operar e se tornou uma das principais técnicas para a modificação de fosforilação de pontos de peptídeos.
(2) Após sintetizar a sequência polipeptídica na resina, os grupos hidroxila da cadeia lateral de Ser, Tyr ou Thr são fosforilados:
Ao realizar a modificação da fosforilação, se o método de condensar diretamente os monômeros fosforilados no polipeptídeo for adotado, o aminoácido fosforilado, devido à sua maior cadeia lateral, causa um aumento no haste estérico, dificultando a condensação com a cadeia peptídica. Além disso, a introdução de aminoácidos subsequentes também se tornará relativamente complexa, especialmente quando houver vários locais de fosforilação. O processo de síntese será extremamente difícil e o produto final será muito complexo, dificultando a separação e o rendimento extremamente baixo. Portanto, quando existem vários locais que exigem fosforilação na cadeia polipeptídica, pode ser considerado para concluir a síntese da sequência polipeptídica na resina primeiro e depois fosforila os grupos hidroxila da cadeia lateral de Ser, Tyr ou Thr. Durante esse processo, primeiro remova seletivamente os grupos de proteção da cadeia lateral do aminoácido a serem rotulados. Para Tyr e Thr, os aminoácidos desprotegidos de suas cadeias laterais podem ser reagidos diretamente. Os grupos de proteção contra cadeia lateral podem ser removidos quantitativamente sob a condição de 1% de TFA/DCM. Neste método, o intermediário ativo do fosforamidato bis-benzil e tetrazol pode ser gerado pela reação com o último, e pode ser ligado ao grupo hidroxila. Em seguida, uma reação de oxidação sob condições de ácido peróxido pode ser realizada para gerar o grupo fosfonil, completando a fosforilação.
Horário de postagem: 2025-07-16