Na pesquisa biológica, geralmente são utilizados polipeptídeos com uma sequência longa.Para peptídeos com mais de 60 aminoácidos na sequência, geralmente são utilizadas expressão gênica e SDS-PAGE para obtê-los.No entanto, este método leva muito tempo e o efeito de separação do produto final não é bom.
Desafios e soluções para síntese de peptídeos longos
Na síntese de peptídeos longos, sempre nos deparamos com um problema, ou seja, o impedimento estérico da reação de condensação aumenta com o aumento da sequência na síntese, e o tempo de reação precisa ser ajustado para completar a reação.Contudo, quanto maior o tempo de reacção, mais efeitos secundários são produzidos e uma porção do péptido alvo é formada.Tais resíduos – cadeias peptídicas deficientes são impurezas essenciais produzidas na síntese de peptídeos longos.Portanto, na síntese de peptídeos longos, o principal problema que devemos superar é explorar as condições e métodos de reação de alta qualidade, de modo a tornar a reação de condensação de aminoácidos mais abrangente e completa.Além disso, reduza o tempo de reação, porque quanto maior o tempo de reação, mais reações colaterais incontroláveis, mais complexos serão os subprodutos.Portanto, os três pontos a seguir são resumidos:
A síntese de microondas pode ser usada: Para alguns aminoácidos encontrados no processo de síntese que não são fáceis de serem integrados, a síntese por microondas pode ser usada.Este método tem resultados notáveis e reduz bastante o tempo de reação e reduz a formação de dois subprodutos principais.
O método de síntese de fragmentos pode ser usado: Quando alguns peptídeos são difíceis de serem sintetizados por métodos de síntese comuns e não são fáceis de serem purificados, podemos adotar toda a condensação de vários aminoácidos em um determinado segmento do peptídeo na cadeia peptídica como um todo.Este método também pode resolver muitos problemas na síntese.
A síntese de acilhidrazida pode ser usada: a síntese de acilhidrazida de peptídeos é um método de síntese em fase sólida do peptídeo Cys N-terminal e da reação química seletiva da hidrazida polipeptídica C-terminal entre a formação de ligações amida para alcançar o método de ligação peptídica.Com base na posição de Cys na cadeia peptídica, este método divide toda a cadeia peptídica em múltiplas sequências e as sintetiza respectivamente.Finalmente, o peptídeo alvo é obtido através da reação de condensação em fase líquida.Este método não só reduz grandemente o tempo de síntese do peptídeo longo, mas também aumenta significativamente a pureza do produto final.
Purificação longa de peptídeos
A particularidade dos peptídeos longos leva inevitavelmente a componentes complexos de peptídeos brutos.Portanto, também é um desafio purificar peptídeos longos por HPLC.série amilóide de processo de purificação de polipeptídeos, absorvendo muita experiência e usada com sucesso na purificação de peptídeos longos.Ao adotar novos equipamentos, misturar vários sistemas de purificação, separação repetida e outros métodos experimentais, a taxa de sucesso da purificação longa de peptídeos foi bastante melhorada.
Horário da postagem: 18 de abril de 2023