Na pesquisa biológica, os polipeptídeos com uma sequência longa são geralmente usados. Para peptídeos com mais de 60 aminoácidos na sequência, a expressão gênica e a SDS-PAGE geralmente são usados para obtê-los. No entanto, esse método leva muito tempo e o efeito final da separação do produto não é bom.
Desafios e soluções para síntese longa de peptídeos
Na síntese de peptídeos longos, sempre enfrentamos um problema, ou seja, o impedimento estérico da reação da condensação aumenta com o aumento da sequência na síntese, e o tempo de reação precisa ser ajustado para fazer a reação completa. No entanto, quanto maior o tempo de reação, mais efeitos colaterais são produzidos e uma parte do peptídeo alvo é formada. Tais resíduos - cadeias peptídicas deficientes são as principais impurezas produzidas na síntese longa de peptídeos. Portanto, na síntese do peptídeo longo, o principal problema que devemos superar é explorar as condições de reação e os métodos de reação de alta qualidade, de modo a tornar a reação de condensação de aminoácidos mais abrangente e cheia. Além disso, reduza o tempo de reação, porque quanto mais tempo o tempo de reação, mais reações colaterais incontroláveis, mais complexos os subprodutos. Portanto, os três pontos a seguir estão resumidos:
A síntese de microondas pode ser usada: Para alguns aminoácidos encontrados no processo de síntese que não são fáceis de serem integrados, a síntese de microondas pode ser usada. Esse método tem resultados notáveis e reduz bastante o tempo de reação e reduz a formação de dois subprodutos principais.
O método de síntese de fragmento pode ser usado: Quando alguns peptídeos são difíceis de serem sintetizados por métodos de síntese comum e não são fáceis de ser purificados, podemos adotar toda a condensação de vários aminoácidos em um certo segmento do peptídeo à cadeia peptídica como um todo. Este método também pode resolver muitos problemas na síntese.
A síntese de acil -hidrazida pode ser usada: A síntese de acil-hidrazida de peptídeos é um método de síntese de fase sólida do peptídeo Cys N-terminal e da reação seletiva química do hidrazida do polipeptídeo C-terminal entre a formação de ligações amidas para obter o método de ligação peptídica. Com base na posição do Cys na cadeia peptídica, esse método divide toda a cadeia peptídica em várias seqüências e as sintetiza, respectivamente. Finalmente, o peptídeo alvo é obtido através da reação de condensação da fase líquida. Esse método não apenas reduz bastante o tempo de síntese do peptídeo longo, mas também aumenta significativamente a pureza do produto final.
Purificação longa de peptídeos
A particularidade dos peptídeos longos inevitavelmente leva a componentes complexos de peptídeos brutos. Portanto, também é um desafio purificar peptídeos longos por HPLC. Série amilóide do processo de purificação do polipeptídeo, absorvendo muita experiência e usado com sucesso na purificação de peptídeo longo. Ao adotar novos equipamentos, mistura de múltiplos sistemas de purificação, separação repetida e outros métodos de experiência, a taxa de sucesso da purificação de peptídeos longa foi bastante aprimorada.
Hora de postagem: 2025-07-03